EpHISTain : Histologie et cytologie
Le plateau EpHISTain propose un soutien technique aux équipes de l’Unité Epigénétique et Destin Cellulaire pour le phénotypage cellulaire et tissulaire
Illustration d’expérimentations réalisées par le plateau EpHISTain montrant de gauche à droite:
Immunofluorescence sur tissus musculaire murin, Marquage de neurone au DiI sur coupe de cerveau murin adulte, Coloration H&E sur coupe de rate murin, RNA FISH sur coupe de cerveau murin, Hybridation in situ sur coupe de tissus murin.
© Myriame MOHAMED
Présentation
EpHISTain supporte les équipes de l’unité dans les domaines de l’histologie et de la cytologie pour accompagner leurs travail de recherche dans l’élucidation du rôle, des mécanismes de mise en place, et de maintien de modifications épigénétiques qui déterminent la plasticité et le destin cellulaire.
Expertises
Ces services visent à apporter notre expertise dans diverses techniques d’histologies, d’histochimie, d’immunohistochimie, d’immunofluorescence, d’hybridation in situ (HIS), de « Fluorescence in situ hybridization (FISH) et de cytologie, pour la production et le marquage de coupes de tissus biologiques (animal ou organoïde), ainsi que le marquage de cellules.
Services
- Soutien technique ou prise en charge des échantillons (frais, fixés, congelés) pour la production de coupes de tissus biologiques. La technique choisie est fonction des problématiques techniques et scientifiques des équipes, ainsi que des traitements nécessaires pour y répondre :
- Dissection, préparation et fixation des tissus (dont embryonnaires)
- Inclusion des tissus (OCT et agarose)
- Coupe de tissus (vibratome ou cryostat), sur lames ou en coupes flottantes
- Traitement des coupes de tissus biologiques. Le choix du traitement dépend du type de tissu, des problématiques techniques et de la question biologique à laquelle doit répondre l’expérimentation :
- Explorer la morphologie des tissus ou l’organisation de structures d’intérêts sur coupes afin de mettre en évidence d’éventuels modifications ou défauts structurels
-
- Coloration histochimique sur coupes de tissus biologiques (ex : crésyl violet)
- Hybridation In Situ (HIS) sur coupes au cryostat, flottantes ou sur lames, pour le marquage de structures spécifiques (ex : marqueurs de couches corticales)
- Caractériser le profil d’expression de gènes d’intérêts (expression ou non et localisation cellulaire) en ciblant l’ARNs ou les protéines
-
- Hybridation In Situ (HIS) sur coupes au cryostat, flottantes ou sur lames
- Immunohistochimie et Immunofluorescence
- FISH (DNA et RNA)
- Imagerie contrôle qualité des résultats (sur le plateau EPI2, EDC)
- Accompagner
- Optimiser et standardiser les protocoles de marquage sur tissus et cellules pour une homogénéité et une reproductibilité qui permettent de croiser les données des équipes.
- Adapter et mettre au point les protocoles de marquage sur tissus ou cellules selon les problématiques spécifiques des équipes, en apportant une expertise technique
- Former les membres d’équipes aux techniques de coupes et de marquages selon les besoins, en partageant les protocoles et les savoir-faires.
Membre
Myriame MOHAMED
Responsable, TCS CNRS
Comité de pilotage
- Véronique Dubreuil, Assistant Professor (Université Paris Cité)
- Céline Morey, Senior Researcher (INSERM)
Contacts
Myriame MOHAMED, TCS CNRS
Centre épigénétique et Destin Cellulaire
CNRS UMR7216 – Université Paris Cité
Lamarck B – 4e étage – pièce 444
35, rue Hélène Brion
75205 Paris Cedex 13
Email : myriame.mohamed@u-paris.fr
Tel : 33 (0)1 57 27 89 25
Fax : 33 (0)1 57 27 89 11
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