Microscopie confocale et laser UVC

La plateforme dispose d’un microscope confocal Zeiss LSM900 Airyscan 2 équipé d’optiques en quartz permettant la transmission d’un laser UVC à 266nm. Ce laser UVC est piloté par un module RappOpto, permettant une irradiation ciblée de cellules vivantes et petits organoïdes.
Il est également équipé d’une chambre d’incubation à CO2.
Les utilisateurs externes souhaitant utiliser le laser UVC 266nm sont invités à prendre contact avec la plateforme : umr7216_epi2imaging@services.cnrs.fr

Rayons de lumière verte rappelant les lasers utilisés pour la technologie de microscopie confocale.

© Image par Ralf Vetterle de Pixabay

Caractéristiques techniques :

Zeiss LSM900 AiryScan 2

Microscope confocal inversé avec chambre d’incubation + CO2
Module Airyscan 2
Adapation de l’ensemble du trajet optique en Quartz pour permettre le passage du laser 266nm.
Equipé de deux objectifs en quartz pour permettre les irradiations UVC (voir tableau).

Caméra : Aucune

Détecteur :
2 détecteurs GaAsP décomposés en 2 détecteurs GaAsP-PMT
1 détecteur Airyscan
1 détecteur TPMT pour imagerie en phase

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe fluorescente X-cite série 120Q (halogénures de mercure, 3000h max)
Lasers :
– Diode laser 405nm, 5mW, laser classe 3B
– Laser à diode 488nm, 10mW, laser classe 3B
– Laser à diode (SHG) 561nm, 10mW, laser classe 3B
– Laser à diode 640nm, 5mW, laser classe 3B

Logiciel d’acquisition :
Zen 3.13 Blue Edition

Objectifs :

Mag. N.A Quality

Transmission

Contrast

 Imm. Working distance (mm) XY Max resolution at 488 nm Z max resolution at 488 nm
10X 0,3 EC PLAN NeoFluar – Air   799 nm 19,8 µm
25X 0,8 LD LCI Plan-Apochromat 25x/0.8 Imm Corr DIC Oil/Water/Glycerin 0.57 at cover glass 0.17    
40X 1 Plan-Apochromat DIC Water 2.5    
40X 1,3 Plan Apo DIC adapted for super-resolution DIC Oil   184 nm 558 nm
63X 1,4 Plan Apo DIC Oil   171 nm 438 nm
40X 0,60 Ultrafluar QUARTZ – Glycerin   400 nm 3,3 µm
100X 1,2 Ultrafluar QUARTZ – Glycerin   200 nm 697 nm

Filtres épifluo :

Name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
DAPI Blue 335-383 395 420-470
GFP Green 450-490 495 500-550
Ds-RED Red 538-562 570 570-640
Laser UVC

Laser :
Laser pulsé 266nm, 20kHz, 15mW Classe IIIB
Durée du pulse : <1ns
Puissance de sortie maximale : >0,5µJ

Module de pilotage :
UGA-42 Firefly RappOpto Electronic

Logiciel d’irradiation :
SysCon avec mode “Click&Fire”, communiquant avec Zen Blue

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