Microscopie épifluorescence

La plateforme possède deux microscopes plein champs permettant l’acquisition de matériel fixé en fluorescence, un microscope plein champs équipé d’une caméra couleur, un microscope de routine à fluorescence pour l’observation de cellules vivantes et un ordinateur d’analyse équipé des logiciels Fiji et Icy. Ces équipements sont réservés à l’usage interne des membres de l’UMR7216.

Image artistique de méduses, en référence aux méduses bioluminescentes d’où est extraite la GFP (Green Fluorescent Protein) qui a révolutionné le monde de l’imagerie.

Caractéristiques techniques :

Leica DMI-6000B "Oldelaf"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Caméra:
Caméra CCD -30ºC régulée
CoolSNAP HQ2 14bits
Taille d’image : 1392×1040 pixels
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 White Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Obj Mag.	N.A	Quality	Transmission Contrast	Imm.	Pixel size (binning 1)	Max resolution at 488nm
10X	0,25	N PLAN	PH1	Air	0,645 μm	1191 nm
20X	0,35	N PLAN	PH1	Air	0,3225 μm	850 nm
40X	0,6	HCX PL Fluotar	PH2	Air	0,161 μm	496 nm
40X	1,25-0,75	HC PL APO CS	–	Oil	0,161 μm	238 nm
63X	1,40-0,60	HCX PL APO	–	Oil	0,102 μm	213 nm
100X	1,40	HCL PL APO CS	PH3	Oil	0,0645 μm	213 nm

Filtres :

Filter name	Colour	Excitation Filter BP	Dichroic Mirror	Suppression Filter BP
A4	Blue	360/40	400	470/40
GFP	Green	470/40	500	525/50
Y3	Cy3 (orange)	545/40	565	610/75
TX2	Red	560/40	595	645/75
Y5	Cy5 (Far red)	620/60	660	700/75
Analyzer cube	–	–	–	Analyzer

Leica DMI-6000B "Lenny"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Camera :
Camera CCD -12ºC régulée
Teledyne Photometrics RETIGA R6
Taille d’image : 2688×2200 pixels
Taille de pixels : 4.54 x 4.54μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Mag.	N.A	Quality	Trans Contrast	Imm.	Pixel size (binning 1)	Max resolution at 488 nm
2,5X	0,07	HC FL PLAN	–	Air	1.816 μm	4,2 µm
20X	0,7	HCL PL APO CORR	–	Oil/Gly	0,227 μm	425 nm
40X	1,30	HC PL APO	–	Oil	0,1135 μm	229 nm
63X	1,40	HCX PL APO CS	PH3	Oil	0,072 μm	212 nm
100X	1,40-0,7	HCX PL APO	–	Oil	0,0454 μm	212 nm

Filtres :

Name	Colour	Excitation Filter BP	Dichroic Mirror	Suppression Filter BP
XF131	Blue	387/28	410	450/65
QMAX green	Green	450-490	500	510-560
N3	Cy3 (orange)	546/12	565	600/40
TX2	Red	560/40	595	645/75
Far Red	Cy5	620-60	660	700-75
Analyzer cube	–	–	–	Analyzer

Leica DM IL LED (Live)

**Gants et blouse obligatoires sur ce poste**

Microscope inversé épifluorescence

Caméra :
Caméra CCD -60ºC régulée
Hamamatsu digital camera C4742-98-24ERG 12 /14 bits
Taille d’image : 1344×1024
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence Leica

Logiciel d’acquisition :
MicroManager

Objectifs :

Mag.	N.A	Quality	Transmission Contrast	Imm.	Pixel size (binning 1)	Max resolution at 488 nm
10X	0,25	N PLAN	PH1	Air	0,645 μm	1,2 µm
20X	0,35	N PLAN	PH1	Air	0,322 μm	850 nm
40X	0,55	CORR	PH2	Air	0,161 μm	541 nm

Filtres :

Name	Colour	Excitation Filter BP	Dichroic Mirror	Suppression Filter BP
B/G/R	Blue/Green/Red	420/30 ; 495 /15 ; 570/20	415 ; 510 ; 590	465/20 ; 530 /30 ; 640/40
GFP ET	Green
TX ET	Red

Leica DMRA2 (Couleur)

Microscope droit épifluorescence
Piloté en X, Y et Z

Camera :
Caméra couleur CCD numérique 5Mpixels
Leica DFC 450C refroidie
(Δ –20ºC comparé à la température ambiante)
Taille d’image : 2560×1920
Taille de pixel : 3.4 x 3.4μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)

Objectifs :

Mag.	N.A	Quality	Transmission Contrast	Imm.	Pixel size (binning 1)	Max resolution at 488 nm
10X	0,30	HC PL Fluotar	–	Air	0,34 μm	992 nm
20X	0,50	HCX PL Fluotar	–	Air	0,17 μm	595 nm
40X	0,75	HCX PL Fluotar	–	Air	0,085 μm	397 nm
100X	1,40-0,7	HCX PL APO CS	–	Oil	0,034 μm	212 nm

Station de travail "Angus"

Une station de travail pour l’analyse d’images est disponible. Cette station est équipée des logiciels gratuits FIJI, IMAGEJ, ICY.

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