Microscopie épifluorescence

La plateforme possède deux microscopes plein champs permettant l’acquisition de matériel fixé en fluorescence, un microscope plein champs équipé d’une caméra couleur, un microscope de routine à fluorescence pour l’observation de cellules vivantes et un ordinateur d’analyse équipé des logiciels Fiji et Icy. Ces équipements sont réservés à l’usage interne des membres de l’UMR7216.

Image artistique de méduses, en référence aux méduses bioluminescentes d’où est extraite la GFP (Green Fluorescent Protein) qui a révolutionné le monde de l’imagerie.

© Image par Carol-Ann Bussières de Pixabay

Caractéristiques techniques :

Leica DMI-6000B "Oldelaf"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Caméra:
Caméra CCD -30ºC régulée
CoolSNAP HQ2 14bits
Taille d’image : 1392×1040 pixels
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 White Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Obj Mag. N.A Quality Transmission Contrast Imm. Pixel size (binning 1) Max resolution at 488nm
10X 0,25 N PLAN PH1 Air 0,645 μm 1191 nm
20X 0,35 N PLAN PH1 Air 0,3225 μm 850 nm
40X 0,6 HCX PL Fluotar PH2 Air 0,161 μm 496 nm
40X 1,25-0,75 HC PL APO CS – Oil 0,161 μm 238 nm
63X 1,40-0,60 HCX PL APO – Oil 0,102 μm 213 nm
100X 1,40 HCL PL APO CS PH3 Oil 0,0645 μm 213 nm

Filtres :

Filter name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
A4 Blue 360/40 400 470/40
GFP Green 470/40 500 525/50
Y3 Cy3 (orange) 545/40 565 610/75
TX2 Red 560/40 595 645/75
Y5 Cy5 (Far red) 620/60 660 700/75
Analyzer cube – – – Analyzer

 

Leica DMI-6000B "Lenny"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Camera :
Camera CCD -12ºC régulée
Teledyne Photometrics RETIGA R6
Taille d’image : 2688×2200 pixels
Taille de pixels : 4.54 x 4.54μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Mag. N.A Quality Trans Contrast Imm. Pixel size (binning 1) Max resolution at 488 nm
2,5X 0,07 HC FL PLAN – Air 1.816 μm 4,2 µm
20X 0,7 HCL PL APO CORR – Oil/Gly 0,227 μm 425 nm
40X 1,30 HC PL APO – Oil 0,1135 μm 229 nm
63X 1,40 HCX PL APO CS PH3 Oil 0,072 μm 212 nm
100X 1,40-0,7 HCX PL APO – Oil 0,0454 μm 212 nm

Filtres :

Name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
XF131 Blue 387/28 410 450/65
QMAX green Green 450-490 500 510-560
N3 Cy3 (orange) 546/12 565 600/40
TX2 Red 560/40 595 645/75
Far Red Cy5 620-60 660 700-75
Analyzer cube – – – Analyzer
Leica DM IL LED (Live)

**Gants et blouse obligatoires sur ce poste**

Microscope inversé épifluorescence

Caméra :
Caméra CCD -60ºC régulée
Hamamatsu digital camera C4742-98-24ERG 12 /14 bits
Taille d’image : 1344×1024
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence Leica

Logiciel d’acquisition :
MicroManager

Objectifs :

Mag. N.A Quality Transmission
Contrast		 Imm. Pixel size
(binning 1)		 Max resolution at 488 nm
10X 0,25 N PLAN PH1 Air 0,645 μm 1,2 µm
20X 0,35 N PLAN PH1 Air 0,322 μm 850 nm
40X 0,55 CORR PH2 Air 0,161 μm 541 nm

Filtres :

Name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
B/G/R Blue/Green/Red 420/30 ; 495 /15 ; 570/20 415 ; 510 ; 590 465/20 ; 530 /30 ; 640/40
GFP ET Green      
TX ET Red      

 

 

Leica DMRA2 (Couleur)

Microscope droit épifluorescence
Piloté en X, Y et Z

 

Camera :
Caméra couleur CCD numérique 5Mpixels
Leica DFC 450C refroidie
(Δ –20ºC comparé à la température ambiante)
Taille d’image : 2560×1920
Taille de pixel : 3.4 x 3.4μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)

Objectifs :

Mag. N.A Quality Transmission
Contrast		 Imm. Pixel size
(binning 1)		 Max resolution at 488 nm
10X 0,30 HC PL Fluotar – Air 0,34 μm 992 nm
20X 0,50 HCX PL Fluotar – Air 0,17 μm 595 nm
40X 0,75 HCX PL Fluotar – Air 0,085 μm 397 nm
100X 1,40-0,7 HCX PL APO CS – Oil 0,034 μm 212 nm
Station de travail "Angus"

Une station de travail pour l’analyse d’images est disponible. Cette station est équipée des logiciels gratuits FIJI, IMAGEJ, ICY.

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