Microscopie épifluorescence

La plateforme possède deux microscopes plein champs permettant l’acquisition de matériel fixé en fluorescence, un microscope plein champs équipé d’une caméra couleur, un microscope de routine à fluorescence pour l’observation de cellules vivantes et un ordinateur d’analyse équipé des logiciels Fiji et Icy. Ces équipements sont réservés à l’usage interne des membres de l’UMR7216.

Image artistique de méduses, en référence aux méduses bioluminescentes d’où est extraite la GFP (Green Fluorescent Protein) qui a révolutionné le monde de l’imagerie.

© Image par Carol-Ann Bussières de Pixabay

Caractéristiques techniques :

Leica DMI-6000B "Oldelaf"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Caméra:
Caméra CCD -30ºC régulée
CoolSNAP HQ2 14bits
Taille d’image : 1392×1040 pixels
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 White Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Obj Mag. N.A Quality Transmission Contrast Imm. Pixel size (binning 1) Max resolution at 488nm
10X 0,25 N PLAN PH1 Air 0,645 μm 1191 nm
20X 0,35 N PLAN PH1 Air 0,3225 μm 850 nm
40X 0,6 HCX PL Fluotar PH2 Air 0,161 μm 496 nm
40X 1,25-0,75 HC PL APO CS Oil 0,161 μm 238 nm
63X 1,40-0,60 HCX PL APO Oil 0,102 μm 213 nm
100X 1,40 HCL PL APO CS PH3 Oil 0,0645 μm 213 nm

Filtres :

Filter name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
A4 Blue 360/40 400 470/40
GFP Green 470/40 500 525/50
Y3 Cy3 (orange) 545/40 565 610/75
TX2 Red 560/40 595 645/75
Y5 Cy5 (Far red) 620/60 660 700/75
Analyzer cube Analyzer

 

Leica DMI-6000B "Lenny"

Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés

Camera :
Camera CCD -12ºC régulée
Teledyne Photometrics RETIGA R6
Taille d’image : 2688×2200 pixels
Taille de pixels : 4.54 x 4.54μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 Series

Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition

Objectifs :

Mag. N.A Quality Trans Contrast Imm. Pixel size (binning 1) Max resolution at 488 nm
2,5X 0,07 HC FL PLAN Air 1.816 μm 4,2 µm
20X 0,7 HCL PL APO CORR Oil/Gly 0,227 μm 425 nm
40X 1,30 HC PL APO Oil 0,1135 μm 229 nm
63X 1,40 HCX PL APO CS PH3 Oil 0,072 μm 212 nm
100X 1,40-0,7 HCX PL APO Oil 0,0454 μm 212 nm

Filtres :

Name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
XF131 Blue 387/28 410 450/65
QMAX green Green 450-490 500 510-560
N3 Cy3 (orange) 546/12 565 600/40
TX2 Red 560/40 595 645/75
Far Red Cy5 620-60 660 700-75
Analyzer cube Analyzer
Leica DM IL LED (Live)

**Gants et blouse obligatoires sur ce poste**

Microscope inversé épifluorescence

Caméra :
Caméra CCD -60ºC régulée
Hamamatsu digital camera C4742-98-24ERG 12 /14 bits
Taille d’image : 1344×1024
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence Leica

Logiciel d’acquisition :
MicroManager

Objectifs :

Mag. N.A Quality Transmission
Contrast
Imm. Pixel size
(binning 1)
Max resolution at 488 nm
10X 0,25 N PLAN PH1 Air 0,645 μm 1,2 µm
20X 0,35 N PLAN PH1 Air 0,322 μm 850 nm
40X 0,55 CORR PH2 Air 0,161 μm 541 nm

Filtres :

Name Colour Excitation Filter BP Dichroic Mirror Suppression Filter BP
B/G/R Blue/Green/Red 420/30 ; 495 /15 ; 570/20 415 ; 510 ; 590 465/20 ; 530 /30 ; 640/40
GFP ET Green      
TX ET Red      

 

 

Leica DMRA2 (Couleur)

Microscope droit épifluorescence
Piloté en X, Y et Z

 

Camera :
Caméra couleur CCD numérique 5Mpixels
Leica DFC 450C refroidie
(Δ –20ºC comparé à la température ambiante)
Taille d’image : 2560×1920
Taille de pixel : 3.4 x 3.4μm

Illumination :
Lumière visible (halogène)

Objectifs :

Mag. N.A Quality Transmission
Contrast
Imm. Pixel size
(binning 1)
Max resolution at 488 nm
10X 0,30 HC PL Fluotar Air 0,34 μm 992 nm
20X 0,50 HCX PL Fluotar Air 0,17 μm 595 nm
40X 0,75 HCX PL Fluotar Air 0,085 μm 397 nm
100X 1,40-0,7 HCX PL APO CS Oil 0,034 μm 212 nm
Station de travail "Angus"

Une station de travail pour l’analyse d’images est disponible. Cette station est équipée des logiciels gratuits FIJI, IMAGEJ, ICY.

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