Microscopie épifluorescence
La plateforme possède deux microscopes plein champs permettant l’acquisition de matériel fixé en fluorescence, un microscope plein champs équipé d’une caméra couleur, un microscope de routine à fluorescence pour l’observation de cellules vivantes et un ordinateur d’analyse équipé des logiciels Fiji et Icy. Ces équipements sont réservés à l’usage interne des membres de l’UMR7216.
Image artistique de méduses, en référence aux méduses bioluminescentes d’où est extraite la GFP (Green Fluorescent Protein) qui a révolutionné le monde de l’imagerie.
© Image par Carol-Ann Bussières de Pixabay
Caractéristiques techniques :
Leica DMI-6000B "Oldelaf"
Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés
Caméra:
Caméra CCD -30ºC régulée
CoolSNAP HQ2 14bits
Taille d’image : 1392×1040 pixels
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm
Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 White Series
Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition
Objectifs :
| Obj Mag. | N.A | Quality | Transmission Contrast | Imm. | Pixel size (binning 1) | Max resolution at 488nm |
| 10X | 0,25 | N PLAN | PH1 | Air | 0,645 μm | 1191 nm |
| 20X | 0,35 | N PLAN | PH1 | Air | 0,3225 μm | 850 nm |
| 40X | 0,6 | HCX PL Fluotar | PH2 | Air | 0,161 μm | 496 nm |
| 40X | 1,25-0,75 | HC PL APO CS | – | Oil | 0,161 μm | 238 nm |
| 63X | 1,40-0,60 | HCX PL APO | – | Oil | 0,102 μm | 213 nm |
| 100X | 1,40 | HCL PL APO CS | PH3 | Oil | 0,0645 μm | 213 nm |
Filtres :
| Filter name | Colour | Excitation Filter BP | Dichroic Mirror | Suppression Filter BP |
| A4 | Blue | 360/40 | 400 | 470/40 |
| GFP | Green | 470/40 | 500 | 525/50 |
| Y3 | Cy3 (orange) | 545/40 | 565 | 610/75 |
| TX2 | Red | 560/40 | 595 | 645/75 |
| Y5 | Cy5 (Far red) | 620/60 | 660 | 700/75 |
| Analyzer cube | – | – | – | Analyzer |
Leica DMI-6000B "Lenny"
Microscope inversé à épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Filtres et objectifs pilotés
Camera :
Camera CCD -12ºC régulée
Teledyne Photometrics RETIGA R6
Taille d’image : 2688×2200 pixels
Taille de pixels : 4.54 x 4.54μm
Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence CoolLED pE-300 Series
Logiciel d’acquisition :
Metamorph avec module Multi-Dimentional Acquisition
Objectifs :
| Mag. | N.A | Quality | Trans Contrast | Imm. | Pixel size (binning 1) | Max resolution at 488 nm |
| 2,5X | 0,07 | HC FL PLAN | – | Air | 1.816 μm | 4,2 µm |
| 20X | 0,7 | HCL PL APO CORR | – | Oil/Gly | 0,227 μm | 425 nm |
| 40X | 1,30 | HC PL APO | – | Oil | 0,1135 μm | 229 nm |
| 63X | 1,40 | HCX PL APO CS | PH3 | Oil | 0,072 μm | 212 nm |
| 100X | 1,40-0,7 | HCX PL APO | – | Oil | 0,0454 μm | 212 nm |
Filtres :
| Name | Colour | Excitation Filter BP | Dichroic Mirror | Suppression Filter BP |
| XF131 | Blue | 387/28 | 410 | 450/65 |
| QMAX green | Green | 450-490 | 500 | 510-560 |
| N3 | Cy3 (orange) | 546/12 | 565 | 600/40 |
| TX2 | Red | 560/40 | 595 | 645/75 |
| Far Red | Cy5 | 620-60 | 660 | 700-75 |
| Analyzer cube | – | – | – | Analyzer |
Leica DM IL LED (Live)
**Gants et blouse obligatoires sur ce poste**
Microscope inversé épifluorescence
Caméra :
Caméra CCD -60ºC régulée
Hamamatsu digital camera C4742-98-24ERG 12 /14 bits
Taille d’image : 1344×1024
Taille de pixel : 6.45 x 6.45μm
Illumination :
Lumière visible (halogène)
Lampe à fluorescence Leica
Logiciel d’acquisition :
MicroManager
Objectifs :
| Mag. | N.A | Quality | Transmission Contrast |
Imm. | Pixel size (binning 1) |
Max resolution at 488 nm |
| 10X | 0,25 | N PLAN | PH1 | Air | 0,645 μm | 1,2 µm |
| 20X | 0,35 | N PLAN | PH1 | Air | 0,322 μm | 850 nm |
| 40X | 0,55 | CORR | PH2 | Air | 0,161 μm | 541 nm |
Filtres :
| Name | Colour | Excitation Filter BP | Dichroic Mirror | Suppression Filter BP |
| B/G/R | Blue/Green/Red | 420/30 ; 495 /15 ; 570/20 | 415 ; 510 ; 590 | 465/20 ; 530 /30 ; 640/40 |
| GFP ET | Green | |||
| TX ET | Red |
Leica DMRA2 (Couleur)
Microscope droit épifluorescence
Piloté en X, Y et Z
Camera :
Caméra couleur CCD numérique 5Mpixels
Leica DFC 450C refroidie
(Δ –20ºC comparé à la température ambiante)
Taille d’image : 2560×1920
Taille de pixel : 3.4 x 3.4μm
Illumination :
Lumière visible (halogène)
Objectifs :
| Mag. | N.A | Quality | Transmission Contrast |
Imm. | Pixel size (binning 1) |
Max resolution at 488 nm |
| 10X | 0,30 | HC PL Fluotar | – | Air | 0,34 μm | 992 nm |
| 20X | 0,50 | HCX PL Fluotar | – | Air | 0,17 μm | 595 nm |
| 40X | 0,75 | HCX PL Fluotar | – | Air | 0,085 μm | 397 nm |
| 100X | 1,40-0,7 | HCX PL APO CS | – | Oil | 0,034 μm | 212 nm |
Station de travail "Angus"
Une station de travail pour l’analyse d’images est disponible. Cette station est équipée des logiciels gratuits FIJI, IMAGEJ, ICY.
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